- #NEB微贴士# 内切酶酶切后需要纯化或者重新配置反应体系吗？不需要，那些都Out 啦。小牛肠碱性磷酸酶（CIP）进行载体去磷酸化时，可以直接在内切酶的反应体系中进行，具体反应步骤如下：
- #NEB微热点# 12月1日,哥伦比亚大学医学研究中心的科学家在《自然-生物技术》杂志上报告称,他们首次成功地将人体干细胞转化成了功能性的肺细胞和呼吸道细胞。这一最新成果可以帮助科学家们研究肺部发育、构建肺部疾病建模、筛查药物并最终制造出可供移植的肺部器官。http://t.cn/8kqst3z查看全文>>展开全文
- #NEB微贴士# 随着甲基化研究的不断升温，NEB专门研发了一款用于以重亚硫酸盐处理的DNA为模板进行PCR的聚合酶--EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶。该酶是 Taq DNA 聚合酶和一种对温度敏感的适配体抑制剂的混合物。在 45℃ 以下抑制聚合酶活性，而在 PCR 热循环条件下又可以释放聚合酶。展开全文
- #NEB微贴士# 众所周知，高保真聚合酶的PCR产物一般末端均不带A尾，那么怎样加尾呢？可以用Taq DNA聚合酶或Klenow片段（3’--5’exo-）添加A尾，需要注意的是，在加尾前需去除高保真聚合酶，否则其3’--5’外切酶活性仍会将加上的A尾切除。
- #NEB微贴士# OneTaq DNA聚合酶扩增长度长，产量高，无论是普通模板还是困难模板，如高GC含量，均可以高效扩增。跟大家分享一下OneTaq使用中的小技巧。🔗 网页链接
- #NEB微贴士# 使用内切酶 SfiI 酶切时，有什么注意事项，和常用的内切酶有什么区别呢? SfiI 完全酶切需要两个拷贝的识别序列，单个识别序列会引起切割不完全或无法切割，在溶液中，SfiI是以四聚体的形式存在，切割时需要两个拷贝的识别序列才能完成切割反应。
- #NEB微贴士# 大家都知道，近期NEB正在升级内切酶缓冲液，升级后有200多中酶均统一于CutSmart buffer，让双酶切反应变得“随心所欲”。那么，更新后的反应缓冲液怎么查看呢，请点击：🔗 网页链接
- #NEB微贴士# 粘性末端、T/A 或平末端连接反应中，使用 T4 DNA 连接酶已经足以高效连接，同时，NEB 还提供更高效的快速连接试剂盒，用以非常困难的连接反应，以下是快速连接试剂盒的操作步骤，以供参考：
- #NEB微贴士# 分子生物学实验中常常是通过退火寡核苷酸产生DNA片段，作为接头、启动子或者插入的目的片段，那么一般退火反应实验条件怎样设置呢？今天就分享一下寡核苷酸的退火实验步骤。
- #NEB微贴士#Taq DNA连接酶是只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对且二者之间没有缺口的条件下才可发生连接反应。因此，可用来检测单碱基替换。在使用时应该有哪些注意事项呢？本酶需 NAD+ 作辅因子，NAD+ 已被添加在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中；为了延长 NAD+ 的半衰期，缓冲液应于 -70℃ 贮存。展开全文
- #NEB微贴士# EcoRI切割 λDNA 分子上的 5 个识别位点，其中对 λDNA 右侧位点的切割速率比中间位点快 10 倍。为什么呢？因为某些限制性内切酶对同一底物的不同位点切割效率不同，这种现象被称为内切酶的位点优势效应（Site Preferences）。下面分享一篇有关内切酶位点优势效应的文章。展开全文
- #NEB微贴士# NEB 内切酶缓冲液更新一段时间了，很多老师有这样的疑问，手里还有原先的酶但是双酶切分析软件已经更新了，怎样找到 "旧"双酶切软件呢，现将链接推荐给大家http://t.cn/zTe0Fy6“；"新"buffer体系请点击🔗 网页链接
- #NEB微贴士# 反转录合成cDNA时，经常使用到M-MuLV反转录酶，那么M-MuLV反转录酶和M-MuLV反转录酶（RNaseH-）有什么区别呢？在用途上怎么区分呢？下面我总结了这两种反转录酶的特性和一般用途，以帮助大家不同实验目的选择合适的反转录酶。
- #NEB微贴士# 在DNA的提取或制备过程中，往往会引入某些污染物，例如：变性剂、苯酚、乙醇、异丙醇、PEG等等，而这些污染物又会影响我们的下游实验，如酶切、修饰或者转化等实验结果，那么一旦出现污染物抑制下游实验的情况，怎样去除呢？请您参考以下表格进行纯化。
- #NEB微贴士# 做酶切实验时，酶浓度太高，需要的酶量较小，想稀释后再使用，可以用1X buffer稀释吗？稀释后能长期保存吗？可以用终浓度1X 的反应缓冲液稀释，但需注意的是，如果用buffer稀释，请稀释后立即使用，不可长期使用。若需要保存，请使用NEB专门的稀释缓冲液进行稀释。展开全文
- #NEB微贴士# 对于做分子生物学研究的你，PCR是再熟悉不过的了吧，可又是高保真扩增，又是长片段、高GC扩增、cDNA、基因组扩增等等，面对眼花缭乱的扩增酶，哪款最适合自己的实验呢？现只要一个表就全解决啦，详情请戳这🔗 网页链接
- #NEB微贴士# PCR是分子生物学实验中最常用的技术，可PCR后无产物也是常见的问题，出现扩增不出产物时，怎样调整反应或考虑哪些因素呢？我们总结了常见的问题及分析，希望能给您的实验提供一些参考。请点击：🔗 网页链接
- #NEB微贴士# T4 DNA 连接酶可以在NEB其他反应缓冲液中进行连接反应吗？可以。在NEBbuffer1,2,3,4以及T4 PNK buffer中都可以进行反应，但必须补充终浓度1mM ATP，因为ATP是T4 DNA连接酶反应的辅助因子。同时，建议含ATP的buffer尽量分装使用，避免反复冻融使ATP降解，影响反应效率。展开全文
- #NEB微贴士# 上周跟大家分享了克隆实验中常见问题及分析，应大家的提议，今天我们整理了中文版分子克隆指南，希望对大家的实验有所帮助。同时，也欢迎大家跟我们分享您实验中的经验和心得。
- #NEB微贴士# 分子克隆是分子生物学实验中最常见的技术，但因其涉及PCR扩增、酶切、连接、转化、阳性克隆验证等多项实验，其中任一步骤都可能关乎整个实验的成败，NEB总结了常见问题的解析，请点击：🔗 网页链接
- #NEB微贴士# 如何判断使用的聚合酶扩增出的产物是否带A尾呢？主要是根据聚合酶是否具有3'→5'外切酶活性来判断，3'→5'外切酶活性的主要功能是校对作用，当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3'→5'外切酶切除，然后再重新合成。因此，具有3'→5'外切酶活性的聚合酶一般不会产生具有A尾的产物。展开全文
- #NEB微趣闻# 湖州师范学院医学院 某老师尝试把下学期的免疫课融合到三国杀的卡牌游戏里面，不知道各位会不会有兴趣呢？
- #NEB微视频# 做连接反应时，选择质量可靠的连接酶是反应成功的关键。NEB的科学家将在下面的视频中分享其中的经验。请关注NEB连接酶系列视频之二——如何正确选择连接酶？《Which_Ligase_Should_I_Choose_》 请点击🔗 网页链接
- #NEB微创新# 单分子测序助力细菌甲基化组的分析。New England Biolabs联合Pacific Biosciences的研究人员利用PacBio RS系统对6种细菌基因组进行了重测序，不仅鉴定出细菌基因组中新的胞嘧啶和腺嘌呤甲基化位点，还鉴定出介导这些表观遗传学标志的甲基转移酶。🔗 网页链接 @生物通网站 展开全文
